怎样增加pcr得率

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/03 06:40:25
怎样增加pcr得率

怎样增加pcr得率
怎样增加pcr得率

怎样增加pcr得率
循环数增加,一般到35个循环,再往上变化不明显;
增加Mg2+浓度,一般buffer里自带的MgSO4能让终浓度达到1-2mM,可以自己加到4mM或6mM;
使用high yield的酶,比如invitrigen的Platinum® Taq;
使用PCR增强剂,比如甜菜碱.
使用较低温度退火,如果有杂带使用,先低温后高温退火.
引物浓度、dNTP浓度和酶浓度都不宜过高.

1,增加循环次数
2,优化PCR体系
3,提高模版浓度