PCR扩增时为什么需要引物呢?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/06 01:56:17
PCR扩增时为什么需要引物呢?

PCR扩增时为什么需要引物呢?
PCR扩增时为什么需要引物呢?

PCR扩增时为什么需要引物呢?
因为DNA聚合时需要3‘OH,这个只能由引物提供(没原因,就因为是那样).这个引物是一小段RNA ,引物绝对是RNA,而不是DNA.看看DNA复制需要什么酶就知道了,需要依赖DNA的RNA聚合酶(DDRP)如果是DNA,那么复制的时候要引物干什么呢?我直接用互补脱氧核糖核酸就完了,干嘛还弄一引物,然后复制完再水解掉?本人生化学的还是不错的,别人都说难,我也不觉得.

这个是DNA聚合酶的特性决定的。DNA聚合酶要延伸DNA连,必须要有一个3`端的羟基,没有这个结构,DNA聚合酶无法合成DNA。
引物的作用,就是和DNA模板连特异性结合,为DNA聚合酶提供3`端羟基。使得PCR继续。
引物是一段单链的DNA。不是RNA。

pcr=聚合酶链反应=聚合酶的链反应
其中链反应说的是这个反应不断循环重复,所以对你的问题可以忽略.
那就只来看聚合酶反应,复制DNA.
首先DNA复制是需要双链的,以一条链为模板,复制另外一条链.因此多出来的那条链就必须要有一个复制的基础.
引物=PRIMER,英文意思基本就是原始的东西,基础的东西,其实就是基础的DNA片段.
结合上面说的理由,你就需要提...

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pcr=聚合酶链反应=聚合酶的链反应
其中链反应说的是这个反应不断循环重复,所以对你的问题可以忽略.
那就只来看聚合酶反应,复制DNA.
首先DNA复制是需要双链的,以一条链为模板,复制另外一条链.因此多出来的那条链就必须要有一个复制的基础.
引物=PRIMER,英文意思基本就是原始的东西,基础的东西,其实就是基础的DNA片段.
结合上面说的理由,你就需要提供一个原始片段来完成复制,所以你需要引物.
而楼上两位说的聚合酶3’方向复制,我感觉这是设计引物时需要考虑到的问题了,经过设计3’端的方向,就可以相对扩充某段靶向DNA.
另外,引物本身是DNA结构,既是由于PCR中的DDNTP中没有RNA依赖的UTP,更是由于TAQ聚合酶本身是DNA聚合酶.

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